棉蚜（Aphis gossypii）是重要棉花害虫之一，严重危害棉花的生产。利用靶标昆虫重要基因的双链RNA进行干涉从而防治农业害虫是当今发展的1种新技术。通过转基因方法，在棉花中表达棉蚜基因的靶标双链RNA（Double strand RNA, dsRNA），特异性地抑制取食棉蚜的内源基因的表达，以期控制蚜虫对棉花的危害。本研究利用棉蚜腺苷三磷酸酶E亚基基因（Adenosine triphosphatase E，ATPase-E）片段，构建其RNA干扰载体，并用农杆菌介导技术转化棉花。PCR技术初步筛查45个独立转化植株，对PCR阳性植株进行DNA印迹（Southern blot）分析，确认外源基因插入的拷贝数，同时利用RT-PCR（Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction, RT-PCR）方法检测dsRNA表达情况。最后结合网棚和大田抗蚜性鉴定分析转基因株系的抗蚜效果。从45个转基因再生植株中获得22株阳性转基因株，其中12株为单拷贝插入。根据农艺性状和dsRNA表达量分析结果，筛选出4个转基因株系，分别为CZ1、CZ2、CZ3、和CZ4。2年的网棚和大田的蚜虫抗性鉴定结果表明转基因棉花CZ1、CZ2和CZ3具有较高的抗蚜性，它们在2015年和2016年的蚜害减退率分别在70%和60%以上。这些转靶标ATPase-E dsRNA的棉花具有较高的抗蚜性，这为棉花抗蚜育种提供了新种质和新方法。